معلومة

هل يشير "RT-PCR" إلى "PCR في الوقت الفعلي" أو "النسخ العكسي PCR"؟

هل يشير


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

غالبًا ما أجد مصطلح "RT-PCR" مستخدمًا في المقالات دون أي تأهيل إضافي. يؤدي البحث عن معنى الاختصار أحيانًا إلى "تفاعل البلمرة المتسلسل في الوقت الفعلي" وأحيانًا "تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي". أفهم أن النسخ العكسي لـ PCR يستخدم النسخ العكسي لتحويل RNA إلى DNA ، والذي يتم تضخيمه بعد ذلك بواسطة طريقة PCR المعتادة. لست متأكدًا من فهمي لما هو PCR في الوقت الفعلي ، ولكن يبدو أنه مختلف عن النسخ العكسي PCR. هل هذه الطرق المميزة لها نفس الاختصار؟ أم أنها تعني بطريقة ما نفس الشيء؟ ما هو المقصود عادة بالمختصر "RT-PCR"؟ هل هناك سياق يمكنني استخدامه للتمييز بينهما؟


يتم استخدام PCR في الوقت الحقيقي تحديد الكمية هدف PCR عن طريق قياس بعض مؤشرات تضخيم الهدف في الوقت الفعلي بعد كل دورة تضخيم ، وبالتالي يُسمى أحيانًا (غالبًا) PCR الكمي (qPCR). مفتاح التمييز بين النسخ العكسي PCR و PCR في الوقت الحقيقي في سياق ورقة أو بروتوكول هو النظر في مادة البداية المستخدمة ومخرجات البيانات.

إذا كانت المادة المصدر هي RNA ، فيجب نسخها عكسيًا إلى cDNA قبل تضخيم PCR. وإذا كانوا يعرضون القياس الكمي لهدف محدد، من المحتمل أن يكون تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي من نوع ما. التحديد الكمي للهدف الجيني من الطبيعي الحمض النووي من المحتمل أن يكون PCR قياسيًا في الوقت الفعلي (ويعرف أيضًا باسم qPCR). القياس الكمي ل RNA الهدف (مثل التعبير الجيني من mRNA) ، هو على الأرجح النسخ العكسي الكمي PCR (RT-qPCR). الشيء نفسه ينطبق إذا كانت مادة البداية هي (كدنا) (المنتج النهائي لتفاعل النسخ العكسي للحمض النووي الريبي). أخيرًا ، يشير أي ذكر لقيم Ct أو Cq (أو delta-Ct أو delta-delta-Ct) عمومًا إلى منهجية كمية في الوقت الفعلي.

إذا كانوا يستشهدون باستخدام RT-PCR لتأكيد وجود أو عدم وجود هدف (يسمى أحيانًا نقطة النهاية PCR) أو لتضخيمه للتطبيقات النهائية مثل التسلسل ، مع عدم ذكر تحديد كمية الهدف المحدد ، فمن المحتمل أن يكون عكسًا قياسيًا- النسخ PCR.

هناك استثناءات لبعض هذه القواعد ، ولكن من المفترض أن تساعدك في الاطلاع على معظم الأدبيات مع فكرة عن الأساليب المستخدمة.

تحرير: في الأيام القليلة الماضية ، رأيت أوراقًا متعددة تستخدم "RT-PCR" كاختصار (على ما أظن) عندما كانوا يتحدثون عن RT-qPCR أو rRT-PCR. كما قلت ، دائمًا استثناءات للقاعدة. لكن طالما أنك تقرأ الطرق ، يجب أن تكون بسيطة بما يكفي لمعرفة ذلك.


شاهد الفيديو: Какие компании проиграют и выиграют от локдауна, отчеты бигтехов, проблемы девелоперов Олег Абелев (شهر نوفمبر 2022).